近日,食品與生物工程學院馬嫄教授課題組在1區TOP期刊Food Bioscience(Q1,IF: 5.2)發表題為“Antibacterial activity of angelica essential oil, its mechanism against Pseudomonas fluorescens, and its application in the preservation of chilled fresh beef”的研究性論文。該文第一作者為研究生袁安琪,通訊作者為馬嫄教授。
熒光假單胞菌(P. fluorescens)是一種革蘭氏陰性細菌,是牛肉貯藏期常見的腐敗菌,可以在冷藏環境中繁殖,從而造成冷鮮牛肉品質的劣變。因此,開發一種安全、有效的抗菌劑來抑制P. fluorescens,以降低食品安全風險并保持冷藏牛肉的質量,已成為牛肉行業的當務之急。
當歸是一種藥用植物,其根和根莖可用于提取當歸精油(AEO)。AEO最主要的活性化學成分是檸檬烯、β-蒎烯、α-蒎烯、α-蒎烯和δ-3-芥子烯。研究發現,從當歸根中提取的精油對金黃色葡萄球菌(S. aureus)、大腸桿菌(E. coli)、綠膿桿菌(P. aeruginosa)和灰色芽孢桿菌(Bacillus grey)具有抗菌活性,但AEO對熒光假單胞菌抗菌機制的研究尚未見報道。
因此,為了更好地了解AEO對 P. fluorescens的抑菌機制,本研究通過最低抑菌濃度(MIC)、最低殺菌濃度(MBC)和細菌生長率研究AEO對P. fluorescens的抗菌活性。采用掃描電子顯微鏡(SEM)觀察了AEO存在下細胞的形態變化;在研究P. fluorescens細胞壁、細胞膜和生物大分子流出的基礎上,深入探討了AEO對細菌細胞內代謝活動的影響。將AEO應用在牛肉保鮮中,考察了AEO在實際應用中的抗菌效果,為AEO在肉品保鮮中的應用奠定了重要基礎。

研究結論
本研究以當歸精油作為抗菌劑,從細胞和代謝水平上研究當歸精油對熒光假單胞菌的抑菌機制,并評價其在牛肉保鮮中的效果。
研究分析AEO對P.fluorescens的抗菌活性發現,AEO對P. fluorescens 的MIC為12.5 μl/mL,MBC為25 μl/mL,SEM觀察到熒光假單胞菌在2MIC的AEO處理后細胞形態受損嚴重,菌體大量死亡,顯著抑制了細胞生長速率。此外,AEO處理導致AKP酶活性和電導率增加,細胞內核酸和蛋白等大分子合成物質明顯泄露,證明細胞壁和細胞膜的完整性被破壞。
非靶向代謝組學分析表明,與對照組相比,熒光假單胞菌經AEO處理后有78個差異代謝物上調,67個下調。這些差異代謝物主要通過核苷酸代謝、氨基酸代謝、碳水化合物代謝和膜轉運阻礙核酸的合成和表達、引起TCA循環受阻和氨基酸限制、能量代謝紊亂及膜損傷。應用結果表明,AEO能夠減緩牛肉pH和TVB-N的增加,有效抑制微生物生長繁殖,使冷鮮牛肉貨架期延長5.39 d,并且能在較長時間內保持牛肉的感官品質。
這項研究為AEO對熒光假單胞菌的抑制機制提供了新的理論依據,為天然抑菌劑的開發和應用提供理論基礎。
圖文賞析





圖 1 不同濃度的 AEO 對 P. fluorescens抑菌效果的研究

圖 2 P. fluorescens的掃描電鏡:(A)對照組;(B)MIC 組;(C)2MIC 組

圖 3 (A) 差異代謝物火山圖;(B) 差異代謝物聚類熱圖;(C) KEGG 代謝通路層次分類圖;(D) KEGG 通路富集分析氣泡圖

圖 4(A)嘌呤代謝相關途徑、(B)碳水化合物代謝相關途徑和(C)氨基酸代謝相關途徑;(D)膜轉運

圖5 AEO 復合膜對(A)冷藏牛肉 pH 值、(B)TVB-N 和(C)感官評分的影響;(D)和(E)菌落總數的 Gompertz 模型
注:**p ≤ 0.01; ***p ≤ 0.001 vs AEO 組
作者簡介:

袁安琪,西華大學2020級農業專業碩士研究生。主要研究方向是農產品貯藏與精深加工。以第一作者發表SCI論文1篇(中科院1區),參與發表SCI論文4篇,中文核期刊論文2篇。獲西華大學研究生創新基金1項,研究生二等學業獎學金2次。

馬嫄,教授,碩士生導師,四川省“課程思政”示范專業(本科、碩士)負責人,四川省線上線下混合式一流課程負責人,西華大學教學名師。主要研究方向為農產品加工及貯藏工程。獲中國輕工業聯合會科學技術獎一等獎、中國糧油學會科學技術獎三等獎、成都市科技進步獎三等獎各1項。授權國家發明專利13項,參與制定標準1項,發表論文50余篇

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